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上海古朵:改良油红O染色液操作步骤

发布日期: 2024-04-24 21:46:01 来源:GC法检测



  脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(如乙醇、等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一,在氧化时释放出能量。中性脂肪染色常常采取苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹、油红O法等。传统方法采用苏丹染料,最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂,较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,

  与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。

  改良油红O染色液大多数都用在显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着,常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性,细胞内出现多数中性脂肪滴;鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%),样本不采用石蜡切片,需用冰冻切片或碳蜡切片,脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。

  充分摇匀A1、A2后,按A1、A2=3:2比例混合静置10min, 即为改良Oil Red O Stain,不宜提前配制;如有条件尽量进行过滤,以免色素沉淀,造成假阳性。

  1、冰冻切片厚度6~10m,不固定或10%固定10min后水洗。

  3、由于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。

  7、甘油明胶封固的样本,保存时间不长。如需长期保存,可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。

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