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ELISA试剂盒运用说明书

发布日期: 2023-11-30 17:53:21 来源:火狐体育全站官网app

  一、操作要素对ELISA成果的影响ELISA操作进程杂乱,操作不妥将引起较大的差错。以下叙说各个进程中的影响要素。

  二、灰区的设置通常情况下,ELISA定性试验以“阳性”和“阴性”来陈述成果,两者间有一条分界线被称为“阳性判别值”(cut-off value,CO值),这是定性免疫测定成果陈述的根据。

  三、标本复查ELISA手艺查验测验进程杂乱,影响要素较多,即便室内质控在控,也或许因孔间差异而形成成果的差异,因而加大复查力度是确保成果准确性的牢靠办法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及罕见形式的检测成果进行复查。

  3.定量测定 即用已知量的规范品作一系列稀释后进行ELISA测定,制作规范曲线,成果以**量或单位表明。在ELISA定量检测中每一块反响板都必须制作相应的规范曲线.成果陈述

  操作进程:用于检测不知道抗原的双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反响孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗刷缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗刷,下同)。

  2.加样:加必定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反响孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗刷。(一起做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

  3.加酶标抗体:于各反响孔中,参加新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗刷。

  4.加底物液显色:于各反响孔中参加暂时制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。5.停止反响

  6.成果断定:可于白色布景上,直接用肉眼调查成果:反响孔内色彩越深,阳性程度越强,阴性反响为无色或极浅,根据所呈色彩的深浅,以“+”、“-”号表明。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规则的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。